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第016章 完美的PCR实验(2/3)

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其原理基本与人体细胞内dna复制像似,但反应体系相对简单。

当然了,这不意味着pcr简单。

相反,pcr是非常难的.

首先通过高温“变性”,把一段双链结构的dna解链,变成两条单链结构dna。

之后“退火”,在低温下让“引物”和作为模板的dna互补结合,形成局部双链。

最后中火“延伸”,通过dna聚合酶催化以引物为起始点的dna链产生延伸反应,变成两条双链结构的dna。

接下来不断重复这个过程。

1变2,2变4,4变8,8变16,16变32……

通过pcr技术,可以从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的dna供分析研究和检测鉴定。

比如亲子鉴定;

比如疫苗研究;

比如病毒疾病防治;

又或者遗传病研究等等,都需要大量用到pcr。

当然,周文今天做的水稻蚜虫生化试剂实验,其实是没有必要做pcr的。

蚜虫是一种很低级的虫子,一般直接用药物作用在其身上,然后看它的遗传特性就行了。

之所以还要做pcr,更多的目的也是为了学习pcr。

pcr反应体系包含了水、缓冲液、dntp(脱氧核糖核苷三磷酸)、引物p1/p2/dna模板以及taq酶。

等一切都准备好之后,周文调节好提取枪的量程,然后提取30μl的水到三组pcr管里。

吸液的时候严格按照操作规程,垂直吸液、慢吸慢放。

换过枪头后,提取了5毫升的缓冲液到pcr管中。

再分别向管中加入dntp/p1/p2/dna模板……

得益于这段时间的学习,除了一开始有些紧张外,周文做起来有条不紊。

等所需原料添加完毕后,接下来就是离心了。

按照要求设定好转速后,等了三分钟,离心完成。

周文从离心机里取出装着混合液的pcr管,立刻放到了pcr仪上,进行扩增。

设定94c预变性4min。

然后设定20次循环扩增阶段。

高温、低温、中温、高温……

1变2,2变4,4变8,8变16,16变32……

周文焦急的等待着,心情就像产房外的丈夫一样,心里默默祈祷着“母子平安”,同时也在想,不知道等会生出来的是男是女?身体健康与否?

就在这时,周文突然想到系统积分可以加快实验进度,与其在这里傻等几个小时,要不加快看看?

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